pH Titrasyonu Biyofizik 2015 Amaç Bu pratiğin amacı öğrencilerin pH, asit baz dengesi, pH metre ve titrasyon hakkında bilgi sahibi olmalarını sağlamak Hedefler Bu pratiğin sonunda öğrenciler, Asit ve baz dengesinin yaşam için önemini, H iyonu konsantrasyonunun normal değerlerini ve patolojik durumlarını tanımlayabilmeli, pH metre kullanımı hakkında bilgi sahibi olabilmeli GİRİŞ • Hidrojen evrenin kütlece %75'ini, atom sayıca %90'nı oluşturur ve bu oranlarıyla evrende en çok bulunan elementtir. • Hidrojen zehirsiz ve havadan 14,4 kez daha hafif bir gazdır. Güneş ve diğer yıldızların termonükleer tepkimeyle vermiş olduğu ısının yakıtı hidrojen olup, evrenin temel enerji kaynağıdır. -252,77 °C'ta sıvı hale getirilebilir. • Sıvı hidrojenin hacmi gaz halindeki hacminin sadece 1/700'ü kadardır. Asitler, suyla hidrojen iyonları üreten hidrojen bileşimleridir. Hidrojen iyonları çözeltiyi asidik yapar. Bütün asitler hidrojen (H+) içerir. Bazlar, suda iyonlaştığında Brønsted-Lowry asit-baz teorisine göre ortama OH(hidroksit) iyonu, Lewis asitbaz teorisine göre ise elektron çifti verebilen maddedir. İlk modern tanım, İsveç'li bilim adamı Svonte ARHENİUS (1884) tarafından Sudaki çözeltilerine H+ iyonu veren maddeler "asit" Sudaki çözeltilerine OHiyonu veren maddeler "baz" İsveç'li kimyacı Sorensen (1909) Hidrojen iyonu derişimini ölçmek için pH SKALASI • • • • • • • • • • • Asitler Formülü Yer (pH) Hidroklorik asit HCl Mide özsuyu (1) Sitrik asit C6 H8 O7 Limon suyu (2.2) Fosforik asit H3 PO4 Coca-Cola gibi Asetik asit CH3 COOH Sirke (2.9) Karbonik asit H2 CO3 Gazoz (3.8) Tartarik asit C4 H6 O6 Şarap Bazlar Amonyak Formülü NH3 Kullanım Yeri Gübre yapımı Sodyum hidroksit NaOH Sabun yapımı Sodyum NaHCO3 Cam yapımı, gübre yapım bikarbonat Asit-baz dengesinin korunması: • • • Tampon Sistemleri Solunum Renal Fonksiyon o pH’ın 7.36 – 7.44 arasındaki değişimler sıkı bir kontrol altında idame ettirilir pH mekanizmasının kontrolü: • Tampon sistemleri genellikle zayıf bir asit ve tuzu veya zayıf bir baz ve tuzundan oluşur. • Vücutta 3 tane önemli kimyasal tampon sistemi mevcuttur. Karbonik asit-bikarbonat tampon sistemi. 1. • Organik ve fiks asitlerinin neden olduğu değişimlerin tamponlanması Protein tampon sistemi 2. • • Amino asit Hemoglobin tampon sistemi tarafından H+ iyonlarının tamponlanması Fosfat 3. • İCF da pH’ ın tamponlanması pH mekanizmasının kontrolü: TAMPON Asit Konjüge baz Ana tampon etkisi Hemoglobin HHb Hb- Eritrosit Protein HProt Prot- Hücre içi Fosfat H2PO4- HPO42- Hücre içi HCO3- Hücre dışı(ECF) Bikarbonat CO2→H2CO3 Tampon Çözeltiler • Asit veya baz ilave edildiği zaman çok az pH değişikliği gösteren çözeltilere “tampon çözeltiler” denir. • Tampon çözeltiler zayıf bir asit ile bu asidin yeterli miktardaki tuzundan oluşmuşlardır. Örneğin, zayıf bir asit olan asetik asit (CH3 COOH) ile bu asitin sodyum tuzu olan sodyum asetat (CH3 COONa) belli oranlarda karıştırıldığında tampon çözelti oluştururlar. Tamponlama Gücü • Bir tampon sisteminin pH’ı sabit tutmadaki etkililiğine tampon sisteminin “tamponlama gücü” denir. pH ÖLÇÜMÜ • Yaklaşık bir pH belirlemesi, pH seviyesi değiştikçe farklı renk alan pH kağıtları veya göstergeleri ile elde edilebilir. • Bu tip göstergelerin doğruluklarında sınırlanmalar mevcuttur. • Çünkü renkli veya koyu örneklerde doğru sonuçlar elde etmek zorlaşır. • • Daha doğru pH ölçümleri bir pH metre ile elde edilir. pH metre, özel bir elektrot sistemi ile bu sistemde meydana gelen membran potansiyel farklarını ölçen bir voltmetreden oluşur. • İki elektrottan biri cam elektrot (pH ölçüm elektrotu), diğeri de referans (calomel) elektrottur. • Cam elektrot,yalnız H+ iyonlarını geçiren cam membran ile çevrili bir tüptür. • Referans (calomel) elektrot ise Hg metali, elektrolit görevini yapan Hg2Cl2 (calomel)ve bir iyon köprüsünden ibarettir. • • Dengeleyici, KCl eriyiğinden oluşur. Bileşik elektrotta hem cam hem calomel elektrot tek gövde içinde bulunur. • Bir maddenin asit mi yoksa baz mı olduğunu turnusol kağıdı, fenolftalein, metil oranj gibi maddeler ile karşılaştırarak anlayabiliriz. • Bu maddeler asitler ve bazlarla farklı renk verirler.Bunlara indikatör veya ayraç denir. Sulu çözeltilerin pH’ı, elektrometrik yöntemler denen, iki elektrot arasındaki potansiyel farkının bir galvanometre ile ölçülmesi esasına dayanan yöntemlerle daha hassas olarak ölçülebilir. pH metre denen aletlerde elektrottan çıkan sinyal, şiddetlendirilir ve pH’ı bilinen bir çözelti tarafından oluşturulan sinyal ile karşılaştırılır. pH Ölçümü Nasıl Yapılır ? pH, elektrik sinyali üreten bir araç (elektrot) kullanılarak pH metre cihazı sayesinde bu elektriksel sinyali, pH birimine çeviren potansiyometrik bir ölçümdür. Üretilen ve ölçülen sinyal bir voltajdır. pH ölçümünü yapabilmek için iki gerilime ihtiyaç vardır, pH ölçümü için gerekli olan elektriksel sinyal bu iki gerilim arasındaki fark ile oluşur. Bu iki gerilim şunlardır: 1. Algılama elektrotu ürün içindeki hidrojen iyon aktivitesinin logaritmasına oransal bir gerilim sağlar. 2. Referans elektrot ideal olarak ürünün aktivitesinden bağımsız sabit ve sürekli bir gerilim sağlar. 3. Referans ve algılama elektrotu arasındaki bu gerilim farkı ph metre tarafından ölçülür ve pH değerine çevrilir. pH Metre, pH Elektrotunun Verdiği Tepkiyi Nasıl Ölçer? Referans elektrotu ve algılama elektrotu arasında oluşan gerilim farkı çözeltideki hidrojen iyonlarının aktifliğine bağlıdır. İdeal bir elektrot için, elektrotun tepkisi Nernst eşitliği ile ifade edilir: E = E0 – 2.3 (RT/nF) log aH+ ifadesinde: E: Referans elektrot ile algılama elektrot arasında oluşan toplam gerilim (mV) E0: aH+ = 1 mol /l deki elektrotun standart gerilimi R: Gaz sabiti T: Sıcaklık ͦ K n: İyonun değerliği F: Faraday Sabiti aH+: Çözeltideki iyonun aktifliği pH metre Dijital pH metre. pH 0-14 arası ölçüm yapar Titrasyon • Asit ve bazların bir çözeltideki derişimlerini ölçmek için “titrasyon” denen işlemden yararlanılır. • Titrasyon işleminde, derişimi bilinen asit veya baz çözeltisi bir cam düzenekten derişimi bilinmeyen asit veya baz çözeltisine nötralizasyon tamamlanana kadar yavaş yavaş ilave edilir. • Nötrolizasyon işleminin bitişi ise, bir pH metre veya bir asit-baz indikatörü ile gözlenebilir. • Titrasyon eğrisi çiziminde pH değeri apsise, asit damla sayısı ordinata olmak üzere grafiğe yerleştirilir. TÜTF BİYOFİZİK Titrasyon Deneyi pK1 pK2 Damla