APOPTOTIC EFFECTS OF COCOA AND APRICOT OILS

APOPTOTIC EFFECTS OF COCOA AND APRICOT OILS CONTAINED IN THE
TANNING PRODUCTS ON CANCER AND NORMAL SKIN CELL LINES
Emel ERGENE1, Handan EMİŞOĞLU2
1
Anadolu University, Faculty of Science, Department of Biology, Eskişehir, TURKEY,
2
Gebze Technology University, Faculty of Science, Department of Molecular Biology and Genetics, Gebze,
Kocaeli /TURKEY
E-mail: eergene@anadolu.edu.tr
In recent years, cocoa and apricot oils are frequently used in the production of cosmetics such
as sun and anti-wrinkle creams. In this study, the cytotoxic and apoptotic effects of cocoa and
apricot oils were investigated on malignant melanoma (Malme-3M) and normal skin fibroblast
(CRL-2120) cells.
The cell viability was determined by WST-1, MTT and NR uptake methods, apoptotic effect
on cell’s morphology by AO/EB flourescien staining, p53 protein level and localization by
immune-fluorescein method with fluorescence microscope. DNA content analysis of the cells
and cell cycle arrest rates, caspase-2 enzyme activation levels were measured by using flow
cytometry.
Malme-3M cells that are treated by essential oils have characteristic apoptotic morphology,
both of two oils induced G1 and S phases of the cell cycle arrest. Increase of p53 levels were
observed in nucleus of cocoa oil treated cells, in cytoplasma and nucleus of apricot oil treated
cells. However, a weak increase of caspase-2 enzyme levels were determined depending on
incubation times.
As a result, cocoa and apricot oil has apoptotic effect in melanoma cells and has the potential
to be pharmaceutical active substance for skin cancer treatment
Keywords: Malme-3M, CRL-2120, caspase-2, apoptosis, p53
BRONZLAŞMA ÜRÜNLERİNDE KULLANILAN KAKAO VE KAYISI
YAĞLARININ KANSERLİ VE NORMAL DERİ HÜCRE HATLARINDA
APOPTOTİK ETKİLERİ
Emel ERGENE1, Handan EMİŞOĞLU2
1
Anadolu Üniversitesi, Fen Fakültesi, Biyoloji Bölümü, Eskişehir, TÜRKİYE,
2
Gebze teknik Üniversitesi, Fen Fakültesi, Moleküler Biyoloji ve Genetik Bölümü, Gebze, Kocaeli / TÜRKİYE
E-mail: eergene@anadolu.edu.tr
Son yıllarda, kakao ve kayısı yağları güneş kremleri ve kırışık giderici krenler gibi kozmetik
ürünlerde yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada, kakao ve kayısı yağlarının sitotoksik
ve apoptotik etkileri malignant melonoma (Malme-3M) ve normal deri (CRL-2120)
hücrelerinde araştırılmıştır.
Hücre canlılığı üzerindeki etkiler WST-1, MTT ve Nörtal Red alıp testleriyle belirlenmiş,
hücrelerin morfolojileri üzerindeki apoptotik etkiler AO/EB floresan boyama ile ve p53 protein
seviyesi ve lokalizasyonu ise immüno-floresan işaretleme metoduyla, floresan mikroskop
altında gösterilmiştir.
Hücrelerdeki DNA içeriği ve hücre döngüsündeki gecikme analizleri, kaspaz-2 enzim aktivitesi
de flow-sitometrik analizlerle belirlenmiştir. Her iki esansiyal yağ uygulanmış Malme-3M
hücreleri belirgin apoptotik morfoloji sergilerken, her iki yağ da hücre döngüsünü G1 ve S
evrelerinde durdurmuştur. Kakao yağı uygulanmış hücrelerin nükleusunda p53 seviyesinde
belirgin bir artış gözlenmiş, kayısı yağı uygulandığında ise p53 proteinin hem sitoplazma hem
de nükleusta biriktiği belirlenmiştir. Diğer yandan, kaspaz-2 enzim aktivasyonunda inkübasyon
süresine bağlı olarak zayıf bir artış gözlenmiştir.
Sonuç olarak; kakao ve kayısı yağları melanoma hücrelerde apoptotoik etkiye sahiptir ve deri
kanserinin tedavisinde farmakolojik olarak aktif bileşenler içermektedir.
Anahtar kelimeler: Malme-3M, CRL-2120, Kaspaz-2, apoptoz, p53