RIDASCREEN® Campylobacter Makale no: C 2401 R-Biopharm AG, Landwehrstr. 54, D-64293 Darmstadt, Germany Tel: +49 (0) 61 51 81 02-0 / Fax: +49 (0) 61 51 81 02-20 Χ 1. Kullanım amacı In vitro diyagnostik kullanım için. RIDASCREEN® Campylobacter testi bir ELISA testi olup gaitada C. jejuni ve C. coli kalitatif tespiti için kullanılır. 2. Özet ve testing açıklaması Dünyada, gıda yolu ile insanlara bulaşan, en çok ishal nedenlerinden biride Salmonellosisin beraberinde olan Campylobacteriosis dir. Giderek artan Campylobacter enteritin oluşumu farklı türlerden yayılma kabiliyeti yüzündendir, bir oyun gibi çalışan hayvanlar ve domestik hayvanlar(kuşlar ve memeliler)Kümes hayvanlarının intestinal yolunda komensal olduğu için , insanın gıda zincirinde yer alır.Ama diğer gıdalar, süt , kıyma ve içme suyu bu patojenleri taşıyan araçlardır. Campylobacter yüksek miktarlarda çevreye yayılır ve sonunda insana gıda yolu ile ulaşır. Campylobacteriosis hastalığına sahip olan hayvanlar ile direk temas ve fekal – oral yol özellikle bebeklerde, Campylobacter enteritin geçme yollarıdır. 500 organizmalar, enfeksiyon dozu düşüktür. Yaklaşık olarak 15 bilinen Campylobacter türünden, C. jejuni ve C. Colien özellikle insanlarda gastroenteritten sorumlu olan türleridir. 2 - 10 gün inkübasyon periyodundan sonra, gaitada ,enfekte patojenler 4 haftaya kadar salgılanır. Bağımsızlık metabolizmasının güçsüzleşmesi durumlarında , enfekte patojenlerin salgılanması kalıcı olabilir. Pek çok enfeksiyon semptomlarını göstermeden ilerlemesine rağmen, hastalık olduğunda , semptomlar prodromal periyoddan sonra , ateş, başağrısı, miyalji, antralji ve yorgunluk olur, enteritin tipik sendromları ishal, abdominal ağrılar ve kramplar. İsal çok sulu ve nadir olarak kanlıdır. Artrit ve Guillain Barré sendromu hastalığın son safalarında nadir olarak görülür.Tedavi genellikle semptomları giderme ve elektrolit solüsyonu vermeyi içerir. Antibiyotiklerle tedavi ciddi durumlarda verilir.Başarılı bir kültür çalışması için taze numune ve ekim içinde hemen numunenin ulaştırılması gerekir. Modern antijen test metodu RIDASCREEN® Campylobacter ELISA testidir. 3. Test prensibi RIDASCREEN® Campylobacter Test, sandviç tip metodunda özel antikorlar kullanır. C. jejuni ve C. coli antijenlerine karşı oluşan spesifik Campylobacter antikorları mikropleytteki kuyucukların yüzeyine uygulanır. Gaitadan hazırlanan numune süspansiyonu ve kontroller kuyucuklara pipetlenir oda sıcaklığında (20 – 25 °C) inkübasyona bırakılır. Yıkama adımından sonra , C. jejuni ve C. coli antijenlerine karşı olan peroksidazla konjuge edilmiş antikorlar eklenir ve oda ısısında (20 – 25 °C) inkübasyona bırakılır. Campylobacter antijenlerinin mevcudiyetinde sandviç kompleks sabitlenmiş antikorlar, Campylobacter antijenleri ve konjuge edilmiş antikorlar içerir.Enzimle işaretli bağlanmamış antikorlar yıkama esnasında uzaklaştırılır.Substrat eklendikten sonra, bağlı enzim daha önce renksiz olan solüsyonun rengini RIDASCREEN® Campylobacter 04-08-12 2 maviye dönüştürür , eğer numune pozitif ise.Stop reaktifi eklenmesiyle de mavi renk sarıya dönüşür.Oluşan rengin şiddeti numunedeki Campylobacter antijenleri ile doğru orantılıdır. 4. Sağlanan reaktifler Her pakette 96 teste yetecek kadar reaktif bulunur. Pley 96 test. Mikrokuyucuklu pleyt, 12 mikrokuyucuklu stripler (kırılabilir) ; C. jejuni ve C. coli antijenlerine karşı Campylobacter-spesifik antikorları ile kaplı Diluent⎮1 100 ml Numune dilüsyon bufer, NaCl buffer solüsyonu; %0.1 Kathon içerir; kullanıma hazırdır, mavi renkli yıkama 100 ml Yıkama buferı, fosfat buffer NaCl solüsyonu (10-kat konsantre); % 0.1 Thimerosal içerir Kontrol ⎮+ 1.8 ml İnaktive edilmiş Campylobacter jejuni; kullanıma hazırdır; % 0.1 Kathon içerir. Konjugat 10 ml Stabilize edilmiş protein solüsyonu içinde , Campylobactere karşı konjuge edilmiş peroksidazlı antikorlar, %0.01 Kathon içerir; kullanıma hazırdır Substrat 10 ml Ure peroksidaz/TMB; kullanıma hazır Stop 6 ml Stop reaktifi, 1 N sülfirik asit kulanıma hazır 5. Saklama gereklilikleri Tüm reaktifler 2 – 8 °C de saklanabilir ve etiketin üzerinde basılı tarih kadar kullanılabilir. Dilüe edilen yıkama solüsyonu 2 – 8 °C de saklanır. Maksimum 4 hafta kullanılabilir.Mikrobiyal kontaminasyona mutlaka önlenmelidir. Miadı geçtikten sonra kalite garantisi geçerli değildir. Alüminyum çanta kilidinden açılmalı, kilit yırtılmamalı. Kullanılmayan kuyucular çantanın içine geri konulmalıdır ve 2 – 8 °C’de inkübe edilmelidir. Renksiz substrat, bozulmasını engellemek ya da okside olarak mavi renge dönüşmesinin önüne geçmek için , direk olarak gün ışığından korunarak saklanmalıdır. Açılan substrat mavi renge dönerse kullanılmamalıdır. RIDASCREEN® Campylobacter 04-08-12 3 6. Ek olarak gerekli reaktifler ve ekipmanlar 6.1. Reaktifler - Distile su ya da deiyonize su 6.2. Aksesuarlar - Test tüpleri - Yıkama ünitesi ya da çok kanallı pipet (300 µl) - Pleyt okuyucu (450 nm ve ≥ 600 nm referans filtre (gerekirse)) - Santrifüj(en az 5000 rpm) - Karıştırıcı, uygun mikropleyt - Vorteks mikser - Alarm saati - Mezür (1000 ml) - Mikropipet 50 - 100 µl ve 1 ml hacim için - Filtre kağıdı (laboratuar havlusu) - %0.5 hipoklorit içeren solüsyon 7. Kullanıcılar için önlemler Sadece in vitro diyagnostik kullanım içindir. Mutlaka eğitimli bir personel tarafından kullanılmalıdır.Medikal laboratuvar çalışanları için olan rehber takip edilmeli ve oradaki direktiflere tamamen uyulmalıdır. Kitte bulunan pozitif kontroller inaktive edilmiş Campylobacter antijeni içerir. Buna rağmen kontroller ve numuneler mutlaka enfekte materyal gibi, ulusal güvenlik kurallarına göre muamele görmelidir. Numuneler ya da reaktifler ağız ile pipetlememeli ve yaralı deriyle, mukoz membran ile teması önlemelidir. Numuneler , eldiven giyilerek çalışılmalı ve test bittiği zaman eller yıkanmalıdır. Numuneler veya reaktifler ile çalışırken sigara içmeyiniz, yemek yiyip içmeyiniz. Pozitif kontrol, numunedilüsyon buffer ve konjugat buffer koruyucu olarak %0.1 Kathon içerir. Bu maddeler deri ve mukoz membran ile temas ettirilmemelidir. Yıkama bufer koruyucu olarak % 0.1 Thimerosal içerir. Deri ve mukoz membran bu madde ile temas etmemelidir. RIDASCREEN® Campylobacter 04-08-12 4 Ure peroksidaz yanmaya sebep olur. Dikkatli kullanın. Stop reaktifi 1 N sülfürik asit içerir.Deri ve elbiseniz ile temastan kaçının.Deriniz temas etmiş ise bol su ile durulayınız. Tüm reaktiflere ve materyallere, enfeksiyon kapma riski olan numuneler gibi davranılmalı ve uygun bir dezenfektan veya otoklav ile 121 °C’de en az 1 saat dezenfekte edilmelidir. DİKKAT: Zehirli gazların oluşumunu önlemek için ,stop reaktifi içeren her atık sıvı hipoklorit solüsyonu eklemeden önce nötralize edilmelidir. 8. Numune toplama ve saklama Gaita numuneleri test başlamadan önce 2 – 8 °C de bekletilmelidir.Eğer 3 günden fazla saklamak gerekiyorsa, numuneler –20 °C’de saklanmalıdır. Bu durumda da numuneler test edilmeden önce oda ısısında tamamen çözülmelidir. Tekrar tekrar çözüp dondurmaktan kaçınılmalıdır. Gaita numunesi ve rektal swap taşıma konteynır ile toplanmalıdır, bu transport medianın içinde koruyucular, hayvan serumu, metal iyonları, oksitleme ajanı ya da deterjan içerir bunlarda RIDASCREEN® Campylobacter testine olumsuz etki yapar. Eğer rektal swap kullanıldıysa, test için, yeteri kadar gaita (yaklaşık 100 mg) alındığından emin olunuz. 9. Test prosedürü 9.1. Genel bilgi Tüm reaktifler ve Mikropleyt Pleyt kullanmadan önce oda sıcaklığına getirilmeli (20 – 25 °C) Kuyucuklar oda sıcaklığına gelene kadar alüminyum çantadan çıkarılmamalıdır.Reaktifler kullanılmadan önce karıştırılmalıdır.Kullanılmayan kuyucuklar ve reaktifler 2 – 8 °C ‘de saklanmalıdır.Kullanılan kuyucuklar tekrar kullanılmamalıdır.Zarar görmüş paketteki malzemeler kullanılmamalıdır. Çapraz reaksiyonu önlemek için numunelerin kit komponentleri ile temasından sakınılmalıdır.Test direk olarak gün ışığına maruz kalmamalıdır. Kuyucuğun üzerini kapatıp buharlaşma kayıplarını engellemenizi tavsiye ederiz. 9.2. Yıkama buferı hazırlama 1 hacim yıkama konsantre bufer ile Yıkama 9 hacim distile suyu karıştırın. Yıkama bufer içinde olan herhangi bir kristalleşme kullanmadan önce 37 °C’de su banyosunda çözülerek kullanılmalıdır. 9.3. Numune hazırlama 1 ml RIDASCREEN® numune dilüsyon buferı Diluent | 1 etiketlediğiniz test tüpüne koyunuz. Tek kullanımlık pipet ile gaitayı çekiniz.(Makale no: Z 0001) yaklaşık olarak 100 µl ikinci işareti geçene kadar.Numune dilüsyon bufer içine koyunuz.Katı gaitalar için , yaklaşık olarak 50-100mg kadar RIDASCREEN® Campylobacter 04-08-12 5 spatül ile alınır ve numune dilüenti bufer içine bırakılır.Gaita süspansiyonunu pipetle çekip bırakarak ya da alternatif olarak mikser veya Vorteks ile karıştırınız.(15sn)Kısa bir süre partiküllerin çökmesi için bekletilir. Temiz süpernatant kullanılır.Eğer test prosedürü ELISA cihazında çalışılacaksa mutlaka süpernatantın temiz olması gerekir.Bu durumda ,numuneyi 5000 rpm’de (yaklaşık olarak. 2300 - 2500 g) 5 dakika boyunca santrifüj edilmelidir. 9.4. İlk İnkübasyon Yeteri kadar kuyucuk çalışma çerçevesine yerleştirildikten sonra 2 damla (100 µl) pozitif kontrol Kontrol ⎮+, numune dilüsyon bufer Diluent | 1 (=negatif kontrol) ve numune süspansiyonu kuyucuklara konur.Oda sıcaklığında (20 – 25 °C) de 60 dakika inkübasyona bırakılır. İnkübasyon sırasında film ile kuyucukların üzerini kapatınız 9.5. Yıkama Yıkamada tamamen direktiflere uymak doğru sonuç elde etmek için çok önemlidir. Kuyucuklarda inkübe edilen madde mutlaka dezenfeksiyon için hipoklorit içeren atık kabına atılmalıdır. Bundan sonra , kalan damlaları için emici bir kağıt üzerinde vurarak alınız.Bundan sonra her seferinde 300 µl olmak üzere , yıkama bufer ile 5 defa yıkayınız.Her yıkamadan sonra her yıkamadan sonra, emici kağıda vurarak kalan damlalar emdirilir. ELISA yıkayıcı kullanıyorsanız, cihazın mikropleyt tipine uygun olduğu kontrol edin.Daha da ötesi partiküle sahip olan numune süspansiyonu pipetlenmiş ise ilk yıkama manuel olarak yapılmalıdır, yoksa yıkayıcının uçlarını tıkayabilir. Aynı zamanda yıkama işleminde tüm sıvının emildiğinden emin olunuz.Her yıkamadan sonra kalan damlaları absorbe edecek bir kağıda veya havluya emdiriniz.Optimum yıkama sonucunu elde etmek için kuyucuk başına en az 600 μl yıkama buffer kullanılması önerilir.Yıkama sayısı daha iyi sonuç elde etmek için 5 den fazla yapılabilir. 9.6. İkinci inkübasyon Her kuyucuğa 2damla (100 µl) enzim konjugat Konjugat eklenir ve oda ısısında (20 – 25 °C) 30dk inkübasyona bırakılır. 9.7. Yıkama Yıkama – Bölüm 9.5. 9.8. Üçüncü İnkübasyon Her kuyucuğa 2 damla (100 μl) substrat Substrat ekleyiniz. Oda sıcaklığında (20 – 25 °C) 15 dk karanlıkta inkübe ediniz. Bundan sonra 1 damla (50 µl) reaktifi Stop ekleyiniz. Dikkatlice RIDASCREEN® Campylobacter 04-08-12 6 karıştırdıktan sonra (pleytin kenarına hafifçe vurarak) ana filtre 450 nm referans filter olarak ≥ 600 nm (opsiyonel) kullanarak okuma yapınız.Mikropleyt olmadan havaya karşı kalibre edin. Not: Yüksek pozitif numuneler,substratı siyah sediment olarak çöktürebilir. 10. Kalite Kontrol – reaktifin miadı Kalite kontrol amacı için, negatif ve pozitif numune çalışılır; testin doğru çalıştığından ve reaktiflerin stabilitesinden emin olunur.Negatif kontrol (O.D.) 450 nm’de < 0.2 ise ve pozitif kontrol > 0.8 ise doğru çalışılmıştır. Eğer negatif kontrol monokromatik çalışma için >0.2 yıkamanın yetersiz olduğunu ifade eder.Eğer bulunan değerler beklenenlerden farklı ise ve substratta bulanıklık varsa ya da maviye dönüşmüş ise reaktifin eskidiğini gösterebilir. Şart koşulan değerlerle sonuçlar çakışmazsa , test tekrar edilmeden önce aşağıdaki noktalar kontrol edilmelidir: − Kullanılan reaktiflerin miadı − Kullanılan ekipmanların fonksiyonları(örn:kalibrasyon) − Test prosedürünü kontrol edin − Kit kontaminasyonuna yönelik akma veya herhangi bir gözle görülen bir bozulma – substrat maviye dönmüş olmamalıdır. Bunlardan emin olduktan sonra, yeni kaset ile testi tekrar ettiğinizde , eğer kontrol bandı görünür değilse, lütfen üretici ya da R-Biopharm distirübütör ile kontak kurunuz. 11. Değerlendirme ve yorumlama 11.1. cut-off hesaplama Cut – off oluşturmak için, negative kontrol OD değerine 0.15 eklenir. cut-off = negatif kontrol OD + 0.15 11.2. Test sonucu Cut off değerinden % 10 da yüksek O.D. ye sahip numuneler pozitif olarak değerlendirilir. Eğer sonuç Cut of değerinin % ± 10 arasında ise şüpheli olarak değerlendirilir.Eğer testin tekrarı da gri zonda çıkarsa numune negatif olarak değerlendirilmelidir. Cut off değerinin %10 altında çıkan değerler ise negatif olarak değerlendirilir. RIDASCREEN® Campylobacter 04-08-12 7 12. Metot Limitleri RIDASCREEN® Campylobacter Test gaita numunesinde C. jejuni ve C. coli antijenlerini tespit eder. Büyük ölçüde numuneler C. lari içerir, bunları da gösterecektir. Test çalışmasında oluşan rengin şiddeti, ciddi klinik semptomların oluşması ilişkisi kullanılamaz. Sonuçlar klinik tablo ile birlikte değerlendirilmelidir. Pozitif sonuçlar, diğer bulaşıcı patojenlerin olmadığı anlamına gelmez. Negatif sonuçlar C. jejuni ve C. coli.enfeksiyonu olmadığını göstermez. Bu enfeksiyon aralıklı olarak salgılanan patojenler ya da numune olan çok küçük miktardaki patojenler tarafından olabilir.Eğer C. jejuni ve C. coli şüphesi var ise, bir başka gaita numunesi alınarak test tekrar edilmelidir.. Şüpheli sonuçlara sebep gaitada virüslerin homojen dağılımında olmamasından kaynaklanabilir. Eğer bu olursa, aynı numuneden yada yeni bir numuneden ikinci bir süspansiyon hazırlanıp test edilmelidir. 13. Performans karakterleri 13.1. Test kalitesi Test karşılaştırması altın standart olan kültür testi ile , RIDASCREEN® Campylobacter Testi karşılaştırıldı. Çalışmalar çok mükemmel bir güvenirlilik olduğunu gösterdi, % 100 hassasiyet ve % 99,6 özgüllük. Karşılaştırma çalışması FDA sertifikalı uzman medical laboratuvarda yapıldı. Toplam 259 taze numune , rutin gaita numuneleri. Tablo 1 RIDASCREEN® Campylobacter ve bakteri kültür çalışmasını gösterir. Tablo 1: RIDASCREEN® Campylobacter ve bakteri kültür çalışması Culture RIDASCREEN RIDASCREEN® Campylobacter 04-08-12 + - + 14 1 - 0 244 8 Hassasiyet: Özgüllük: Pozitif prognosis değeri: Negatif prognosis değeri: 100 % 99.6 % 93.3 % 100 % 13.2. Çapraz reaksiyon İntestinal yolda olan çeşitli patojenik organizmalar RIDASCREEN® Campylobacter Testi ile teste edildi ve çapraz bir reaksiyon görülmedi. Araştırmalarda 106 -108 patojen / ml içeren ve bir gece BHI içinde bekleyen numune kullanıldı ve çift çalışma yapıldı.Okuma 450 nm de yapıldı.Sonuçlar in Tablo 2’de dir. Table 2: Patojenik bakterilerle çapraz reaksiyon. Dilüe edilmemiş Kültür test edilen organizma Acinobacter lwoffi Aeromonas hydrophila anerogeneses Aeromonas hydrophila hydrophila Cirobacter freindii Cirobacter freindii Enterobacter cloacae Enterobacter faecalis Enterobacter faecium Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia hermannii Lactococcus lactis Listeria innocua Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus vulgaris Providencia stuartii Pseudomonas auruginosa Pseudomonas fluorescens Pseudomonas fluorescens Pseudomonas putida Salmonella agona Salmonella choleraesius Salmonella Infantis Salmonella ohio Samonella thyphimurium Sratia proteamaculans Shigella flexneri Shigella sonnei Staphylococcus aureus Strptococcus agalactiae RIDASCREEN® Campylobacter 04-08-12 orijin DSM 2403 DSM30020 DSM30016 DSM30047 DSM30039 DSM30054 DSM2570 DSM20477 Isolate Isolate Isolate DSM4560 DSM20481 SLCC5639 DSM788 DSM4479 DSM30119 DSM6676 DSM939 DSM4358 DSM50124 DSM291 Isolat DSM4224 Isolate Isolate Isolate DSM4487 DSM4782 DSM5570 DSM20372 Isolate OD 0.101 0.083 0.064 0.057 0.058 0.168 0.124 0.11 0.111 0.146 0.114 0.053 0.065 0.046 0.045 0.126 0.012 0.086 0.255 0.083 0.057 0.182 0.066 0.069 0.202 0.407 0.103 0.041 0.062 0.068 0.13 0.041 sonuç neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg pos neg neg neg neg neg pos pos neg neg neg neg neg neg Numune Kültürü 1 : 11 Pu. OD 0.058 0.046 0.046 0.045 0.044 0.045 0.047 0.057 0.061 0.047 0.043 0.045 0.043 0.045 0.046 0.087 0.073 0.042 0.053 0.046 0.046 0.144 0.046 0.055 0.055 0.061 0.041 0.038 0.039 0.04 0.135 0.047 result neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg 9 Strptococcus dysgalactiae Streptococcus uberis Escherichia coli (O157:H7-) Escherichia coli (O116:H21) Escherichia coli (0111:H-) Escherichia coli (022:H8) Escherichia coli (026:H11) Candida albicans Samonella enteritidis Morganella morganii POSKO NEGKO Cut-off Isolate Isolate Isolate Isolate Isolate Isolate Isolate ATCC 10231 DSM9898 DSM6675 0.041 0.04 0.131 0.066 0.052 0.061 0.055 0.044 0.12 0.058 2.555 0.046 0.196 neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg 0.063 0.039 0.039 0.056 0.038 0.05 0.041 0.044 0.061 0.043 2.568 0.043 0.193 neg neg neg neg neg neg neg neg neg neg 13.3. Presizyon Intra-test 24 –kat kit kontrolü (pozitif kontrolnegatif kontrol) ve ortalama-titre (mpr) ve düşük titre (lpr) C. jejuni ve C. coli içeren numuneler ile yapıldı. Sonuçlar Tablo 3’de sıralanmıştır. Tablo 3: Intra-test Numuneler NegKo PosKo C.jejuni C.jejuni C.coli C.coli OD450 nm CV (%) 0.042 2.701 1.039 0.494 1.257 0.734 1.8 4 8.2 10.5 4.7 4.6 mpr lpr mpr lpr Inter-test 6-kat kontrol ve yukarıda tariflenen numuneler 5 gün çalışıldı. Sonuçlar Tablo 4’de sıralanmıştır. Tablo 4: Inter-test Tarih Gün 2 Gün 1 Numuneler OD450 nm NegKo 0.043 PosKo 2.646 C.jejuni mpr 1.081 C.jejuni lpr 0.589 C.coli mpr 1.182 C.coli lpr 0.671 CV (%) 6.5 3.4 6.1 3.2 3.9 5.1 RIDASCREEN® Campylobacter Gün 3 OD450 nm CV (%) OD450 nm CV (%) 0.041 7.2 0.040 4.7 2.337 3.2 2.515 3.1 0.891 4.5 0.948 5.4 0.371 8.1 0.466 5.9 0.886 4.8 1.002 9.7 0.515 6.0 0.568 7.1 04-08-12 Gün 4 OD450 nm 0.042 2.474 0.995 0.453 0.961 0.544 Gün 5 CV (%) 5.7 3.4 5.3 7.3 5.8 7.3 CV OD450 nm (%) 0.040 7.7 2.508 3.9 0.981 5.0 0.424 8.4 0.965 7.4 0.510 8.4 10 Referanslar 1. JI, Greenberg HB, Guerrant RL (eds) Infections of the gastrointestinal tract. Raven Press, New York, pp 225 – 248 2. Kist M, Bereswill S (2001) Campylobacter jejuni. In: Mühldorfer I, Schäfer KP, (eds) Skirrow MB, Blaser MJ (1995): Campylobacter jejuni. In: Blaser MJ,Smith PD, Ravdin Emerging bacterial pathogens. Contrib Microbiol Vol.8. Karger, Basel, pp 150 –165. 3. Skirrow MB (1977) Campylobacter enteritis: a new disease. Br Med J 2: 9 –11. 4. Rees JH, Soudain SE, Gregson NA, Highes RA (1995) Campylobacter jejuni infection and Guillain-Barré syndrome. N Engl J Med 333: 1374 – 1379. 5. Beumer RR, Cruysen JJ, Birtantie IR (1988) The occurrence of Campylobacter jejuni in raw cows milk. J Appl Bacteriol 65: 93 – 96. 6. Jones K (2001) Campylobacters in water, sewage and the environment. J Appl Microbiol 90: 68S –79S 7. Skirrow MB, Turnbull GL, Walker RE, Young SEJ (1980) Campylobacter jejuni enteritis Transmitted from cat to man. Lancet 1: 1188. 8. Steinbrückner B, Härter G, Pelz K, Kist M (1999) Routine identification of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli from human stool samples. FEMS Microbiol Lett 179: 227 – 232. 9. Kist M (2002) Lebensmittelbedingte Infektionen durch Campylobacter. BundesgesundheitsblGesundheitsforsch- Gesundheitsschutz 45: 497 –506. RIDASCREEN® Campylobacter 04-08-12 11