SOPERMAKROGOZENEKLi KRiYOJEL AFiNiTE SORBENTLER

I. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, 22-24 Haziran 2005, Hacettepe Üniversitesi, Ankara
Poster-21
GENOMiK DNA SAFLA~TIRILMASI i~iN SOPERMAKROGOZENEKLi KRiYOJEL AFiNiTE SORBENTLER Gazde Baydemir, Mehmet
Odaba~1
ve Adil Denizli Hacettepe Oniversitesi, Kimya Bdlumu, Biyokimya A.B.D. Beytepe/Ankara ~ekilde
Monolitik kolonlar, kolon etkinligini kaybetmeksizin analitierin hlzli bir
olanak saglayan kromatografik malzemelerdir. Geleneksel kolonlar ile
SIVI
basrncrna
ka~1
olu~an
direncin
du~uk
aynlmasrna
kar~lla~tlnldlgrnda
olmasl monolitik kolonlann en onemli
ozelliklerindendir.
Bu
cali~manln
amaci monolitik bazll supermakrogozenekli kriyojel afinite sorbentlerin
hazlrlanmasl ve sulu cozeltiden genomik DNA
ara~tlrllmasldlr.
saf1a~tlnlmasrnda
kullanllabilirliklerinin
Supermakrogozenekli monolitik PHEMA bazil kolonlar monomer olarak 2­
hidroksi etil metakrilat, fonksiyonel ko-monomer olarak N-metakroil-(L)-histidin metilester
(MAH)-Zn
2
+
ve C8praz baglaYlcl olarak da etilen glikol dimetakrilat'rn radikal kriyo­
kopolimerizasyonu
(belirli
bir
slcakllk
yontemiyle 5 ml'lik plastik tQplerde
arallgrnda
sentezlenmi~tir.
dondurarak
ko-polimerize
Karakterizasyon amaclyla fonksiyonel
monomer olarak se<;ilen MAH monomeri, NMR ve FTIR analizleri
kriyojel afinite sorbentier spesifik yijzey alan tayini,
elektron mikroskopu ile karakterize
edilmi~tir.
~i~me
yapllml~tlr,
edilmemi~
aynca
testleri, FTIR ve taramall
DNA adsorpsiyon kapasitesi cozelti
arttlk<;a azalml~tlr. Maksimum DNA adsorpsiyonu pH Tde gozlenmi~tir. Zn
modifiye
etme)
2
+
akl~
hlZI
iyonu ile
kriyojel afinite sorbentiere non-spesifik DNA adsorpsiyonu ihmal
edilebilir duzeydedir.
Kriyojel afinite sorbentlere sulu <;ozeltiden
maksimum DNA
adsorpsiyonu 32.9 mg/g' dlr. Iyonik ~iddetin artmaslyla adsorpsiyon kapasitesinde azalma
gozlenmi~tir.
Kriyojel afinite sorbentlere, adsorpsiyon kapasitesinde onemli bir azalma
olmakslzln 20 defa adsorpsiyon-desorpsiyon
i~lemi uygulanml~tlr.
59