Hazırlık ve Saklama

Katalog numarası: 306UR-0025 25 mL Kit
Hazırlık ve Saklama
8°C
Immunalysis benzoilekgonin İdrar Enzim Immunoassay kitin reaktifleri kullanıma
hazır sağlanır ve doğrudan buzdolabından kullanılabilmektedir.
Reaktif şişeleri kullanılmadığında vidalı kapakları ile sıkıca kapalı kalmalıdır.
Kitin son kullanma tarihi etiket üzerinde belirtilir. Kit bekletilebilir
Katalog Numarası: 306UR-0100 100 mL Kit
Katalog Numarası: 306UR-0500 500 mL Kit 2°C
Katalog Numarası: 306UR-0060W 60 mL Kit
Kullanım Amacı:
Tatmin edici performans 2-8 ° C buzdolabında saklandığı takdirdedir.
2-8ºC arasında saklandığında kiti 1 yıl stabildir. Reaktifler cihaz üzerinde 2-8ºC de
saklandığında 28 gün stabildir.
Immunalysis benzoilekgonin İdrar Enzim Immunoassay 150 ng/mL ve 300 ng/mL bir
çift cutoff homojen ELISA testidir. Test, otomatik klinik kimya analizörleri, insan idrar
benzoilekgonin kalitatif ve yarı-kantitatif analiz için laboratuarlarda kullanım için
tasarlanmıştır. Bu test benzoilekgonin karşı kalibre edilir. Bu in vitro cihaz sadece
yönerge kullanımı içindir.
ÖRNEK TOPLAMA - Saklama ve Kullanma Talimatları
İdrar numuneleri ticari standardı idrar toplama kaplarına alınmalıdır. Numuneler
büyük artefaktlardan yoksun olduğundan emin olun.
İdrar örneklerinin
karıştırılması hatalı sonuçlara neden olabilir. Numuneler tahlil önce iyice karışmış
olmalıdır. Tekrarlanan dondurma ve çözdürmelerden kaçınılmalıdır.
TÜM İDRAR ÖRNEKLERİNİ POTANSİYAL ENFEKTE OLARAK ELE ALIN.
Yarı-kantitatif mod, GC-MS doğrulayıcı yöntemle onay için numunenin, uygun bir
seyreltme belirlemek için laboratuarlar etkinleştirme amaçlıdır veya kalite kontrol
prosedürlerini laboratuvarda kurmak.
Immunalysis benzoilekgonin İdrar Enzim immunoassay Kiti yalnızca bir
ön analitik test sonucu sağlar.
Daha spesifik alternatif bir kimyasal
yöntem onaylanmış analitik sonuç elde etmek için kullanılmalıdır. Gaz
Kromatografi/ Kütle Spektrometrisi (GC-MS) veya Sıvı Kromatografi /
Kütle Spektrometrisi (LC/MS) önerilen doğrulama yöntemidir. Klinik
düşünce ve profesyonel karar herhangi bir ilaç bağımlılık testinde
uygulanmalıdır, özellikle ilk pozitif sonuçlarda kullanılıyorsa.
Test Prosedürü
Sabit bir sıcaklıkta muhafaza edebilen analizörler, pipetleme örnekleri ve
reaktifler, karıştırma reaktifler, doğru reaksiyon zamanlama ve 340 nm 'de
enzimsel oranlar, ölçme testini gerçekleştirmek için kullanılabilir.
Kullanım parametreleri içeren analizör özel protokol sayfasına bakınız.
KALİTE KONTROL VE KALİBRASYON
Tahlil performansın sağlanması için iyi laboratuvar uygulamaları olarak kontrol
örneklerinin kullanılması önerilmektedir. Kontrol sonuçları laboratuvar tarafından
belirlenen aralıklar arasında olması gerekir.
Bu test çift cutoff destekler. ‘’ Pozitif’’ ve ‘’negatif’’ numuneleri ayırt etmek için
kalitatif analiz için ya 150 ng/ml veya 300 ng/mL cutoff düzeyi kalibratör kullanılır.
Yarı-kantitatif analiz için tüm kalibratörler kullanılır.
TESTİN AÇIKLAMASI
Immunalysis benzoilekgonin İdrar Enzim immunoassay Kiti insan idrar numunesinde
benzoilekgonin varlığını tespit etmek için hassas bir in vitro testidir.
Kokain vücutta, ecgonine ve ecgonine metil ester den daha hızlı, benzoilekgonine
metabolize edilir. Benzoilekgonin boşaltımı ilacın verilmesinden sonra maksimum 4 ila 8
saat
ve birkaç günlük bir aralık zarfında yavaş yavaş azalır. Kokain intranazal
uygulamasına takiben idrar benzoilekgonin konsantrasyonu dozlamadan sonra ortalama
pik 35 mikrogram/ml, 48 72 saatlik bir sürede ortalama ile azalan 0.4 mikrogram / ml. 25
mg'lık bir oral kokain alınmasından sonra, dozlamadan 6-12 saat sonra pik idrar
benzoilekgonin konsantrasyonları 7.9 mikrogram/ml ulaşır. Kokain genellikle 8 - 12
SONUCLAR VE BEKLENEN DEĞERLER
Kalitatif Sonuclar
Absorbans (ΔA) değerinde değişiklik gösteren bir örnek, eşit ya da daha büyük
büyük 150 ng / ml ya da 300 ng/ml cutoff kalibratör ile elde edilen pozitif olarak
kabul edilir. Bir örnek, cutoff kalibratör ile elde edilen değerden daha düşük
absorbans (ΔA) değerinde bir değişim sergiliyorsa negatif olarak kabul edilir. Yarı
kantitatif Sonuclar
Örneklerinde ilaç konsantrasyonunun kaba bir tahmini tüm kalibratörler ile bir
çalışan standart eğri ve standart eğri örnekleri hesaplanması ile elde edilebilir.
saatte belirlenir, oysa benzoilekgonin 72 saat boyunca algılanır.
PROSEDÜR PRENSİBİ
Testte benzoilekgonin koyun poliklonal antikor kullanılmaktadır. Test (G6PDH)
benzoilekgonin etiketli glikoz-6-fosfat dehidrojenaz rekabete dayalı ve antikor
bağlanma yeri sabit miktarda idrar örneğindeki serbest ilaca. Örnekte serbest ilacın
yokluğunda, antikor ilaç konjugat enzimine bağlanır ve enzim aktivitesini inhibe edilir.
Bu idrar numunesindeki ilaç konsantrasyonu ve enzim aktivitesi arasında bir doz
yanıt ilişkisi oluşturur. G6PDH Enzim aktivitesi NAD dan NADH dönüştürülmesiyle
340 nm’de spektrofotometrik olarak tespit edilir.
SINIRLAMALAR
Bu test sadece insan idrarıyla kullanım için tasarlanır.
Borik Asit idrar koruyucu olarak tavsiye edilmez.
Yer almayan diğer maddeler ve faktörler teste müdahaleye ve yanlış sonuçlara
yol açabilir.
Sonuçların yorumlanması idrar konsantrasyonların sıvı alımı ve diğer biyolojik
değişkenler ile yoğun değişebilir olduğu dikkate alınmalıdır. Bir ilacın varlığında
tek bir sonuç üreten immünoassay ve metabolitleri tamamen bireysel
bileşenlerin konsantrasyonunu belirler.
REAKTİFLER
Immunalysis Benzoylecgonine Urine Enzyme Immunoassay Kit
Antibody/Substrate Reagent (RA) - 'Koruyucu olarak sodyum azit ile HEPES
tamponunda benzoilekgonin, glikoz-6-fosfat (G6P) ve nikotinamit adenin dinükleotit
(NAD) poliklonal koyun antikorları içerir.
ÖZEL PERFORMANS ÖZELLİKLERİ
Olympus AU400 analizörü ile elde edilen performans sonuçları aşağıda
gösterilmiştir.
Enzyme Conjugate Reagent (RE) - HEPES benzoilekgonin ile etiketlenmiş glikoz-6fosfat dehidrojenaz (G6PDH) koruyucu olarak sodyum azid ile tampon içerir.
Yarı kantitatif kesinlik kalibratörler ve kontroller ile 20 gün, günde 2 çalışma
tekrarlayarak 2 (N=80) olarak tespit edildi.
Gerekli Ek Malzemeler (ayrı satılır):
Tablo 1. Yarı kantitatif kesinlik 150ng/mL ve 300 ng/mL cutoff
Konsantrasyon (ng/mL)
Sonuç
Toplam Sonuç
150 ng/mL Cutoff
Katalog No.:
10000-15 veya 1000025
10001-15 veya 1000125
10002-15 veya 1000225
10003-15 veya 1000325
3000-15 veya 3000-25
Immunalysis Multi-Drug Calibrator Level 1 Kalibratör içerir
Benzoilekgonin 150 ng / ml
Immunalysis Multi-Drug Calibrator Level 2 Kalibratör içerir
Benzoilekgonin 300 ng / ml
Immunalysis Multi-Drug Calibrator Level 3 Kalibratör içerir
Benzoilekgonin 500 ng / ml
Immunalysis Multi-Drug Calibrator Level 4 Kalibratör içerir
Benzoilekgonin 1000 ng / ml
Immunalysis Multi-Drug Control Set 1 Düşük Kontrol içerir
1(112.5 ng/mL Benzoilekgonin içerir) ve YÜKSEK Kontrol
1 (187.5 ng/mL Benzoilekgonin içerir)
3001-15 veya 3001-25 Immunalysis Multi-Drug Control Set 2 Düşük Kontrol içerir
2(225 ng/mL Benzoilekgonin içerir) ve YÜKSEK Kontrol
2 (375 ng/mL Benzoilekgonin içerir)
37,5ng/mL
75ng/mL
112.5ng/mL (Kontrol DÜŞÜK)
150ng/mL Kalibratör
187.5ng/mL (Kontrol YÜKSEK)
225ng/mL
262,5ng/mL
300ng/mL
80 Negatif
80 Negatif
80 Negatif
25 Neg / 55 Poz
80 Pozitif
80 Pozitif
80 Pozitif
80 Pozitif
300 ng/mL Cutoff
75ng/mL
150ng/mL
225ng/mL (Kontrol DÜŞÜK)
300ng/mL Kalibratör
375ng/mL (Kontrol YÜKSEK)
450ng/mL
525ng/mL
600ng/mL
UYARILAR
1) H303 Reaktifler yutulduğunda zararlı olabilir.
2) H290 Reaktifler koruyucu olarak Sodyum Asit içerir. Bu reaktifleri bertaraf ederken
bakır ile reaksiyona girerek potansiyel olarak patlayıcı metal azit
oluşturabileceğinden sıhhi tesisatta yol açabilecek asit birikmesini önlemek için
büyük hacimlerde su ile yıkayın.
3) Son kullanım tarihi geçmiş reaktifler kullanmayın.
Günlük kalibrasyon önerilir.
-1KI-306UR
NEG
NEG
NEG
N/A
POZ
POZ
POZ
POZ
NEG
NEG
NEG
N/A
POZ
POZ
POZ
POZ
80 Negatif
80 Negatif
80 Negatif
24 Neg / 56 Poz
80 Pozitif
80 Pozitif
80 Pozitif
80 Pozitif
Kalitatif kesinlik kalibratörler ve kontroller ile 20 gün, günde 2 çalışma tekrarlayarak 2
(N=80) olarak tespit edildi.
Tablo 2: Yarı kantitatif kesinlik 150ng/mL ve 300 ng/mL cutoff
Konsantrasyon (ng/mL)
Sonuç
Toplam Sonuç
150 ng/mL Cutoff
37,5ng/mL
80 Negatif
NEG
75ng/mL
80 Negatif
NEG
112.5ng/mL (Kontrol DÜŞÜK)
80 Negatif
NEG
150ng/mL Kalibratör
36 Neg / 44 Poz
N/A
187.5ng/mL (Kontrol YÜKSEK)
80 Pozitif
POZ
225ng/mL
80 Pozitif
POZ
262,5ng/mL
80 Pozitif
POZ
300ng/mL
80 Pozitif
POZ
300 ng/mL Cutoff
75ng/mL
80 Negatif
NEG
150ng/mL
80 Negatif
NEG
225ng/mL (Kontrol DÜŞÜK)
80 Negatif
NEG
300ng/mL Kalibratör
37 Neg / 43 Poz
N/A
375ng/mL (Kontrol YÜKSEK)
80 Pozitif
POZ
450ng/mL
80 Pozitif
POZ
525ng/mL
80 Pozitif
POZ
600ng/mL
80 Pozitif
POZ
Doğruluk
80 idrar örneklerinin toplamı önce dış laboratuvarlar tarafından teyit ve Immunalysis
benzoilekgonin İdrar Enzim Immunoassay tarafından analiz edildi.
Immunalysis Benzoylecgonine Urine Enzyme Immunoassay The HEIA cutoffs were
Pozitif sonucları negatif sonuclarından ayırt etmek için HEIA cutoffl’lar 150 ng/ml ve 300
ng/benzoilekgonin dır.
150 ng/mL cutoff (Kalitatif ve Yarı Kantitatif): İki yöntemde 39 numune negatifdir.
both methods. İki yöntemde 40 numune pozitiftir. Test ile bir (1) numune pozitif ve LC/MSMS ile negatif. Sonuclar Tablo 3 de gösterilir.
Özgüllük
Immunalysis benzoilekgonin İdrar Enzim Immunoassay özgüllüğü aşağıda listelenen
bileşiklerin her biri için inhibisyon eğrilerinin çıkarılması suretiyle tespit edildi. Sonuçlar,
Tablo 6 ve Tablo 7'de özetlenmiştir ve metabolit veya deneyin her cutoff için yaklaşık olarak
eşdeğer bir yanıt elde etmek için gereken bileşiğin minimum konsantrasyonu olarak ifade
edilir:
Tablo 6: İlgili ilaçlar ile Çapraz Reaktivite (150ng/mL cutoff)
Analit
Kons. (ng/mL)
% Çapraz-Reaktivite
Benzoilekgonin
150
100,00
m-Hydroxybenzoylecgonine
150
100,00
Kokain
100.000
0,15
Ecgonine
59.000
0,25
Ecgonine metil ester
100.000
N.D.
Kokaetilen
100.000
N.D.
Norkokain
100.000
N.D.
N.D. = <0.05% veya cutoff denkliğinden daha az
Tablo 7: İlgili ilaçlar ile Çapraz Reaktivite (300ng/mL cutoff)
Analit
Benzoilekgonin
m-Hydroxybenzoylecgonine
Kokain
Ecgonine
Ecgonine metil ester
Kokaetilen
Norkokain
N.D. = <0.05% veya cutoff denkliğinden daha
az
Girişim
İlaç yokluğunda, endojen maddelerin, borik asit, pH ve Immunalysis benzoilekgonin
İdrar Immunoassay kullanılarak benzoilekgonin geri kazanımı ile ilgili özel bir ağırlık
potansiyel bozucu (LOW her bir potansiyel hata kaynaklarının bilinen miktarlarda spike
değerlendirildi 112.5ng / mL ve 225 ng / mi) ve yüksek (187.5ng / mL ve 375 ng / ml),
150 ng / ml ve 300 ng / ml cutoff için kontrol eder. İlgili olmayan ilaçlar
Interferans 100,000 ng/mL ye kadar aşağıdaki potansiyel hata kaynaklarının
konsantrasyonlarda eklenmesi ile gözlenmiştir. Asetaminofen, asetilsalisilik asit, Kafein,
Difenhidramin ve İbuprofen 500.000 ng / ml kadar ilave edildiğinde. Lorazepam
glukuronid, Morfin 6D-glukuronid, Norbuprenorphine ve Sufentanil Sitrat 50,000 ng / mL
kadar ilave edildiğinde.
Tablo 3:
LC/MS-MS
Immunalysis benzoilekgonin
İdrar Enzim Immunoassay
(+)
(–)
(+)
40
0
(–)
1
39
LC/MS/MS ile doğrulanmış tahlil Performansı - 150 ng / ml Cutoff (Kalitatif)
Benzoilekgonin Konsantrasyonu
<75g/mL
75~149ng/mL 150~225ng/mL >225ng/mL
Kalitatif/Pozitif
0
1*
4
36
Kalitatif/Negatif
36
3
0
0
*LC/MS/MS ile numune 124ng/mL benzoilekgonin içerir.
Anlaşma
(%)
98
100
LC/MS/MS ile doğrulanmış tahlil Performansı - 150 ng / ml Cutoff (Yarı Kantitatif)
Benzoilekgonin Konsantrasyonu
Tip
<75g/mL
75~149ng/mL 150~225ng/mL >225ng/mL
Yarı Kantitatif/Pozitif
0
1*
4
36
Yarı Kantitatif/Negatif
36
3
0
0
*LC/MS/MS ile numune 124ng/mL benzoilekgonin içerir.
Anlaşma
(%)
98
100
Tip
4-Bromo-2,5,Dimethoxyphenethylamine,
6-Acetylcodeine,
6-Acetylmorphine,
7Aminoclonazepam, 7-Aminoflunitrazepam, 11-hydroxy-delta-9-THC, 11-nor-9 carboxy-deltaTHC, Acetaminophen, Acetylsalicylic Acid, Alprazolam, Amitriptyline, Amobarbital, S-(+)
Amphetamine, Benzylpiperazine, Bromazepam, Buprenorphine, Bupropion, Butabarbital,
Butalbital,
Caffeine,
Cannabidiol,
Cannabinol,
Carbamazeprine,
Carisoprodol,
Chlordiazepoxide, Chlorpromazine, cis-Tramadol, Clobazam, Clomipramine, Clonazepam,
Clozapine, Codeine, Cotinine, Cyclobenzaprine, Dehydronorketamine, Delta-9-THC,
Demoxepam, Desakylflurazepam, Desipramine, Dextromethorphan, Diazepam, Digoxin,
Dihydrocodeine, Diphenhydramine, Doxepin, EDDP, 1R,2S(-)-Ephedrine, 1S,2R(+)-Ephedrine,
Ethyl β-D-glucuronide, Ethylmorphine, Fenfluramine, Fentanyl, Flunitrazepam, Fluoxetine,
Flurazepam, Haloperidol, Heroin, Hexobarbital, Hydrocodone, Hydromorphone, Ibuprofen,
Imipramine, Ketamine, Lamotrignine, Levorphanol Tartrate, Lidocaine, Lorazepam, Lorazepam
Glucuronide, Lormetazepam, LSD, Maprotiline, MDA, MDEA, MDMA, Meperidine,
Meprobamate, Methadone, Methamphetamine, Methaquolone, Methoxetamine, Methylone,
Methylphenidate, Midazolam, Morphine,Morphine 3-D-glucuronide, Morphine 6-D-glucuronide,
Nalorphine, Naloxone, Naltrexone, Naproxen, N-desmethyltapentadol, Nitrazepam,
Norbuprenorphine, Norcodeine, Nordiazepam, Norketamine, Normorphine, Norproxyphene,
Norpseudoephedrine, Nortriptyline, Olanzapine, Oxazepam, Oxycodone, Oxymorphone, PCP,
Pentazocine,
Pentobarbital,
Phenobarbital,
Phentermine,
Phenylephedrine,
Phenylpropanolamine, Phenytoin, PMA, Prazepam, Propoxyphene, Propranolol, Protriptyline,
R,R(-)-Pseudoephedrine, S,S(+)-Pseudoephedrine, Ranitidine, Ritalinic Acid, Salicylic Acid,
Secobarbital, Sertraline, Sufentanil Citrate, Tapentadol, Temazepam, Theophylline,
Thioridazine,
Trazodone,
Triazolam,
Trifluoromethylphenyl-piperazine,
Trimipramine,
Venlafaxine, Verapamil, Zolpidem Tartrate
300 ng/mL cutoff (Kalitatif ve Yarı Kantitatif): İki yöntemde 40 numune negatifdir.
both methods. İki yöntemde 40 numune pozitiftir. Sonuclar Tablo 4 de gösterilir.
Tablo 4.
Immunalysis benzoilekgonin
İdrar Enzim Immunoassay
(+)
(–)
LC/MS-MS
(+)
40
0
(–)
0
40
LC/MS/MS ile doğrulanmış tahlil Performansı - 300 ng / ml Cutoff (Kalitatif)
Benzoilekgonin Konsantrasyonu
Tip
<150ng/mL 150~299ng/mL 300~450ng/mL >450ng/mL
Kalitatif/Pozitif
0
0
4
36
Kalitatif/Negatif
36
4
0
0
LC/MS/MS ile doğrulanmış tahlil Performansı - 300 ng / ml Cutoff (Yarı Kantitatif)
Benzoilekgonin Konsantrasyonu
Tip
<150ng/mL 150~299ng/mL 300~450ng/mL >450ng/mL
Yarı Kantitatif/Pozitif
0
0
4
36
Yarı Kantitatif/Negatif
36
4
0
0
Endojen Maddeler, pH ve Özgül Ağırlık
Aşağıda belirtilen konsantrasyonlarda, aşağıdaki bileşiklerin ilave edilmesinde
interferans gözlenmemiştir. Borik Asid 1%w/v 150ng/mL cutoff ile ve 300ng/mL cutoff ile
interferans gösterir.
Anlaşma
(%)
100
100
Tablo 8: Endojen Maddeler, pH ve Özgül Ağırlık
Analit
Aseton
Askorbik asit
Bilirubin
Kreatinin
Etanol
Galaktoz
γ-Globulin
Glukoz
Hemoglobin
İnsan Serum Albümin
Oksalik Asit
Riboflavin
Sodyum Asit
Sodyum Klorit
Sodyum Fluorit
Üre
pH
Özgül Ağırlık
Anlaşma
(%)
100
100
Analitik Kurtarma
Negatif insan idrarına yüksek konsantrasyonlu benzoilekgonin katıldı ve seri bir şekilde
aşağıdaki konsantrasyonlara seyreltildi. Her seviye için ilaç konsantrasyonu hesaplanmış
ve Immunalysis benzoilekgonin İdrar Enzim immunoassay ile elde edilen ortalama
konsantrasyon, aşağıdaki Tablo 5'te gösterilmektedir.
Tablo 5: Analitik Kurtarma 150 ng/mL ve 300ng/mL cutoff
Sözde Kons. (ng/mL)
100
150
200
300
400
500
600
700
800
900
1000
Hesaplanan Ortalama Kons. (ng/mL)
98,9
162,9
194,7
304,5
419,7
489,9
602,8
736,4
803,1
946,0
996,0
% Geri
98,9
Kazanım
108,6
97,4
101,5
104,9
98,0
100,5
105,2
100,4
105,1
99,6
Konsantrasyon
1,0 g/dL
1,5 g/dL
0,002 g/dL
0,5 g/dL
1,0 g/dL
0,01 g/dL
0,5 g/dL
2,0 g/dL
0,300 g/dL
0,5 g/dL
0,1 g/dL
0,0075 g/dL
1% w/v
6,0 g/dL
1% w/v
6,0 g/dL
3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, ve 11
1.000, 1.002, 1.005, 1.010, 1.015, 1.020, 1.025, ve 1.030
REFERANSLAR
1)
Baselt R. Disposition of Toxic Drug and Chemicals in Man. English Edition (2008)
Avrupa Yetkili Temsilcisi: CEpartner4U ,
Esdoornlaan 13, 3951DB Maarn. The
Netherlands. www.cepartner4u.eu
IMMUNALYSIS CORPORATION
829 Towne Center Drive
Pomona, CA 91767
07/2015 (909) 482-0840
-2KI-306UR
% Çapraz-Reaktivite
100,00
100,00
N.D.
N.D.
N.D.
N.D.
N.D.
Kons. (ng/mL)
300
300
100.000
100.000
100.000
100.000
100.000
Revizyon: F.0
Revizyon Tarihi: