Taq DNA Polimeraz
advertisement
TAQ DNA POLĐMERAZ Kat. No. Unite SNP 10X A Buffer SNP 10X B Buffer MgCl2 25 mM SNPTQ-S 100 0,3 ml 0,3 ml 0,3 ml SNPTQ-25 250 0,75 ml 0,75 ml 0,75 ml SNPTQ-5 500 1,5 ml 1,5 ml 1,5 ml SNPTQ-10 1000 2x 1,5 ml 2x 1,5 ml 2x 1,5 ml SNPTQ-50 5000 15 ml 15 ml 15 ml GĐRĐŞ Notlar; SNP Taq DNA Polimeraz, PCR ve diğer moleküler biyoloji uygulamalarında • oldukça yüksek aktivite gösteren, ısıya dayanıklı rekombinant bir Taq DNA Polimerazdır. Enzim Thermus aquaticus’tan izole edilmiştir ve yaklaşık bölümünden ayrı bir alanda hazırlanmalıdır. • olarak 94 kDa moleküler ağırlığa sahiptir. SNP Taq DNA polimeraz, 5’-3’ DNA polimeraz ve 5’-3’ exonuclease aktivitesine sahiptir. PCR reaksiyon karışımı, DNA izolasyon ve PCR ürünlerinin analiz SNP 10X Buffer B içerisinde 25 mM MgCl2 bulunmaktadır, 1X MgCl2 konsantrasyonu 2.5 mM dır. • Bazı çalışmalarda, en uygun sonuç için daha fazla miktarda MgCl2’e ihtiyaç duyulmaktadır. Bu nedenle Buffer’lara ek olarak 25 mM MgCl2 ÜNĐTE TANIMI verilmektedir. Bir ünite; standart deneme koşullarında 10 nmol dNTP’yi 72ºC’de 30 dk’da asit çöktürülebilir forma dönüştürecek şekilde kullanmayı tanımlamaktadır. Konsantrasyonu 5000 unite / ml’ dir. • Aktivitesi 72 °C’ de 60 Nükleotid / Saniye uzamadır. Enzim – 20 °C de ve karanlıkta saklanmalıdır. • Tavsiye edilen MgCl2 konsantrasyonu 1,5 mM - 6 mM arasıdır. Bufferlar ve MgCl2 +4°C de ve/veya –20°C de karanlıkta saklanmalıdır. • Enzim 10 mM K-Phosphate (pH: 7.4) , 0.1 mM EDTA, % 50 Gliserol, % SAKLAMA KOŞULLARI • • ÜRÜN ÖZELLĐKLERĐ • 0.1 Triton X-100, % 0.1 Tween 20 içerir. • ÖRNEK KULLANIM PROTOKOLÜ SDS Elektroforezi saflık testi sonucu saflık oranı >% 95’ dir. Bu protokol PCR çalışmalarının ilk denemelerinde yol gösterici olarak kullanılabilir. Fakat inkübasyon süreleri, sıcaklık, kullanılacak DNA miktarı gibi uygun reaksiyon koşulları, her çalışma için değişmekte ve çalışılan SNP 10X A Buffer MgCl2 içermeyen Amonyum Buffer. bölgeye bağlı olarak farklı optimizasyonlar gerektirebilmektedir. Standart bir PCR çalışması için gereken bileşenler, aşağıda belirtilen miktarlara uygun SNP 10X B Buffer 25 mM MgCl2 içeren Amonyum Buffer. olarak hazırlanmalıdır. Sorularınız için, lütfen Ar-Ge bölümü ile temasa geçiniz. tech@snp.com.tr Bileşen 10X Buffer (A veya B) dNTP miks MgCl2 * Primer A Primer B Taq DNA Polimeraz Distile Su DNA Toplam Hacim Hacim/Reaksiyon 5 µl 0.8 µl Son Konsantrasyon 1X UYARILAR 0.2 mM her bir dNTP için 1,5 mM – 6 mM 0.1-1 µM 0.1-1 µM 1-5 ünite Oda sıcaklığında unutulmuş bileşenler kullanılmamalıdır. • Bileşenler eğer dondurulmuşsa, oda sıcaklığında tamamen eritilip, baş aşağı • Belirtilenden fazla Taq DNA Polimeraz kullanımı sorunlara yol açabilir. • Taq DNA Polimeraz vücut içinde kullanıma uygun değildir. Sadece in vitro laboratuar kullanımı içindir. • 50 µl eritiniz. Belirli bölgelerde yoğunlaşan tuz konsantrasyonlarının eşit şekilde dağılması için solüsyonların çözünmesi ve karıştırılması önem taşımaktadır. Taq DNA Polimerazın raf ömrü etikette belirtilmiştir. Tarihi geçen ürün kullanılmamalıdır. Kullanılacak 10X Buffer A veya 10X Buffer B, 25 mM MgCl2, dNTP, ve solüsyonlarını Saklama koşullarına uygun olarak saklanmalıdır. • edilerek hafifçe karıştırıldıktan sonra kullanılmalıdır. (*) Kullanılan buffer 10X Buffer B ise, MgCl2 gerekmeyebilir. primer • Düzenleme Tarihi: 12.03.2012
